Oxitest是以氧化誘導(dǎo)時間來表征產(chǎn)品的氧化穩(wěn)定性，以90℃、6bar、上樣量4.5g（以粉末中油脂質(zhì)量計）條件下樣品的氧化誘導(dǎo)時間測定為例。儀器加熱到設(shè)定溫度后，將稱量好的樣品放入反應(yīng)槽中，密封。在樣品測定過程中，儀器自動向反應(yīng)槽中充入高純氧氣，待反應(yīng)槽內(nèi)達到設(shè)定壓力后，開始自動記錄反應(yīng)槽內(nèi)壓力變化。反應(yīng)槽內(nèi)的壓力變化可分為三個階段：初始平穩(wěn)階段、快速下降階段、反應(yīng)階段。在加速氧化的初期，反應(yīng)槽內(nèi)的氧氣壓力維持恒定，隨著時間的延長，氧化反應(yīng)開始，氧氣壓力逐漸下降。在初始平穩(wěn)階段和快速下降階段內(nèi)做兩條切線，交點即為氧化誘導(dǎo)時間。樣品與氧氣反應(yīng)的能力決定該儀器的測定的產(chǎn)品氧化誘導(dǎo)時間。

Oxitest分析粉末油脂氧化穩(wěn)定性的參數(shù)優(yōu)化

Oxitest氧化誘導(dǎo)時間（記作：IPo）受到樣品質(zhì)量、加速氧化溫度和氧氣壓力等參數(shù)的影響。通過單因素實驗，優(yōu)化確定Oxitest測定粉末油脂氧化穩(wěn)定性的加速氧化條件。

樣品質(zhì)量對IPo的影響

測定時，粉末質(zhì)量直接影響測定的油脂質(zhì)量，而油脂的質(zhì)量又會直接影響氧化反應(yīng)速率，進而對氧化誘導(dǎo)時間的測定產(chǎn)生影響。以DHA粉末油脂進行實驗，取不同質(zhì)量，氧氣壓力6bar，于90℃加速氧化測定其氧化誘導(dǎo)時間IPo。隨著粉末質(zhì)量的增加，誘導(dǎo)時間不斷降低，這是由于粉末越多，粉末中油脂量越大，與氧氣更加容易發(fā)生氧化反應(yīng)。這說明，粉末油脂中油脂質(zhì)量是影響IPo的關(guān)鍵因素。結(jié)合儀器說明書和文獻中的樣品質(zhì)量設(shè)定值，利用Oxitest測試粉末油脂產(chǎn)品時，上樣量以樣品中的油脂質(zhì)量計，保持在4.5g。

溫度對IPo的影響

Oxitest儀測定110℃、100℃、90℃條件下7個PUFA粉末油脂的IPo，所有樣品測定時的氧氣壓力為6bar，樣品中油脂含量4.5g。隨著溫度的增加，樣品的氧化誘導(dǎo)時間不斷減少。當(dāng)溫度為Oxitest*高氧化溫度110℃時，樣品的氧化誘導(dǎo)時間在3-5h范圍內(nèi)，不能區(qū)別不同樣品之間氧化穩(wěn)定性的差異。隨著溫度的降低，樣品的誘導(dǎo)時間增加，不同樣品之間誘導(dǎo)時間的差異逐漸明顯。參考IPr的*佳范圍10-20h，在此范圍內(nèi)，Oxitest也能表征不同產(chǎn)品之間的氧化穩(wěn)定性差異。因此，將Oxitest的氧化誘導(dǎo)時間也限定在10-20h之間，確定*佳加速氧化溫度為90℃。

氧氣壓力對IPo的影響

氧氣壓力的大小會直接影響樣品的氧化反應(yīng)速率，同樣對氧化誘導(dǎo)時間的測定產(chǎn)生影響。因而，需考察確定測定時的適宜氧氣壓力。在110℃、樣品中油脂質(zhì)量4.5g條件下，改變氧氣壓力，測定樣品的氧化誘導(dǎo)時間。兩種樣品氧氣壓力增大，氧化反應(yīng)速度不斷加快，誘導(dǎo)時間下降。當(dāng)氧氣壓力達到*高8bar時，樣品的誘導(dǎo)時間較小，不能區(qū)別不同樣品之間的氧化穩(wěn)定性。當(dāng)氧氣壓力降低到4bar以下時，氧化反應(yīng)速率**降低，儀器難以計算出氧化誘導(dǎo)時間結(jié)果。在未加說明的情況下，利用Oxitest測定出的粉末油脂氧化誘導(dǎo)時間，均是在6bar氧氣壓力條件下進行的。

因而，Oxitest測定粉末油脂氧化穩(wěn)定性的*適條件為溫度90℃，氧氣壓力6bar，樣品中油脂含量為4.5g。

Oxitest用于粉末油脂氧化穩(wěn)定性檢測的可行性

壁材對IPo的影響

在110℃、6bar氧氣壓力下，Oxitest同樣對5種壁材進行測試。測試過程中，麥芽糊精和辛烯基琥珀酸淀粉酯的氧氣壓力保持恒定。在加速氧化初期，酪蛋白酸鈉、乳清濃縮蛋白、脫鹽乳清粉三種樣品的氧氣壓力呈現(xiàn)緩慢下降的趨勢。這可能是由于蛋白中殘留的油脂發(fā)生了氧化反應(yīng)。經(jīng)過25h的加速氧化后，氧氣壓力下降到5bar左右并保持平衡，氧化已基本停止，整個過程壓力下降不大。結(jié)合樣品在110℃、6bar條件下的氧化誘導(dǎo)時間，在3-5h左右，該時間段內(nèi)，壁材氧化所致的氧氣壓力下降非常小，而粉末樣品氧化所致氧氣壓力可下降到2bar左右。因此，壁材對于Oxitest誘導(dǎo)時間的計算影響可忽略。

PUFA粉末油脂Oxitest氧化誘導(dǎo)時間與氧化穩(wěn)定性的比較

（1）自然存放過程中PUFA粉末油脂的IPo

產(chǎn)品的氧化誘導(dǎo)時間主要取決于其與氧氣的反應(yīng)能力，隨著儲藏時間的延長，粉末油脂發(fā)生部分氧化，其與氧氣的反應(yīng)能力逐漸減小，表現(xiàn)為樣品的IPo呈逐漸增加的趨勢。由樣品的過氧化值變化可知，樣品分別在常溫儲藏9個月和6個月后都變質(zhì)，過氧化值超過標(biāo)準(zhǔn)限定值。此時，兩種樣品的IPo均比初始值增大了2h左右，且與初始氧化誘導(dǎo)時間具有**性差異，這說明Oxitest不適合表征都變質(zhì)的粉末油脂的氧化穩(wěn)定性。

（2）60℃存放PUFA粉末油脂的IPo

Oxitest測定了60℃儲藏的PUFA粉末油脂樣品，評估其對氧化嚴(yán)重的粉末油脂樣品氧化穩(wěn)定性的檢測情況。隨著加速氧化時間的延長，樣品的IPo呈逐漸增加的趨勢，同樣與樣品實際氧化穩(wěn)定性變化情況不符。利用Oxitest分析菜籽油60℃加速氧化過程中的穩(wěn)定性，結(jié)果表明，加速氧化時間越長的樣品，Oxitest氧化誘導(dǎo)時間越長。這說明Oxitest不適合表征已經(jīng)發(fā)生嚴(yán)重氧化的樣品的氧化穩(wěn)定性。

（3）不同抗氧化劑添加量PUFA粉末油脂的IPo

驗證Oxitest用于粉末油脂抗氧化性能評估的可行性，利用Oxitest在90℃、氧氣壓力6bar、粉末中油脂含量4.5g條件下，測定中添加了不同抗氧化劑的粉末油脂的氧化誘導(dǎo)時間IPo。

與IPr的結(jié)果相同，添加了TBHQ的粉末油脂，IPo增加*大，抗氧化能力*好。AP的抗氧化效果強于VE。這同樣與文獻報道的結(jié)果一致，說明Oxitest同樣能夠表征粉末油脂的抗氧化性能。然而，添加了VE的粉末油脂，IPo也隨著VE添加濃度的增加而增加，這一結(jié)果與IPr的變化趨勢不同。這是由于兩種氧化誘導(dǎo)時間的加速氧化溫度不同，IPr是在120℃下測定的，高溫可能會影響VE的結(jié)構(gòu)，造成其抗氧化性能降低。評價會對油脂抗氧化能力的結(jié)果產(chǎn)生影響，高溫加速氧化條件下的實驗結(jié)果與常溫儲藏條件下的結(jié)果存在差異。溫度過高，某些易揮發(fā)的抗氧化劑（BHA、BHT）會損失，抗氧化性能下降，某些酚類物質(zhì)會分解。加速氧化溫度越低，其結(jié)果與常溫儲藏的結(jié)果越接近。

因此，Oxitest能夠表征粉末油脂的氧化穩(wěn)定性，對于熱敏性的抗氧化劑的抗氧化效果表征更好。

（4）Oxitest測定7種PUFA粉末油脂的氧化穩(wěn)定性和貨架期比較

進一步評價Oxitest測定結(jié)果的可靠性，根據(jù)阿倫尼烏斯方程可知，將各樣品的溫度倒數(shù)和誘導(dǎo)時間倒數(shù)作圖，可以得到樣品誘導(dǎo)時間的擬合方程以及斜率，并能推算出樣品的活化能和貨架期。

7種樣品的擬合方程相關(guān)系數(shù)均大于0.99，整體高于Rancimat的擬合方程相關(guān)系數(shù)。由方程推算出的樣品活化能范圍在61.16~85.32kJ/mol。同時，也與DHA魚油的活化能值62kJ/mol接近。顯然，Oxitest推算出的活化能結(jié)果符合實際情況。但是，根據(jù)5種常溫儲藏樣品的實驗結(jié)果，按照《世界的DHA和EPA組織（GODE）》標(biāo)準(zhǔn)，Oxitesst推算出的產(chǎn)品貨架期小于產(chǎn)品實際的貨架期，這可能是由于儀器本身的加速氧化條件引起的，但這并不影響儀器準(zhǔn)確表征響粉末油脂的氧化穩(wěn)定性。

因此，Oxitest可用于新制備的DHA、ARA類PUFA粉末油脂的氧化穩(wěn)定性評估，亦可用于添加不同抗氧化劑粉末油脂的氧化穩(wěn)定性評估；但是，不可用于已經(jīng)發(fā)生氧化的PUFA粉末油脂的氧化穩(wěn)定性評估。